IDENTIFICAÇÃO DE HIBRIDIZAÇÃO EM PASPALUM COM MARCADORES MICROSSATELITES E INTERMICROSSATELITES
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Data
2022-12-20
Autores
DANIEL, Natalia
PEZZOPANE, Cristiana de Gaspari
VIGNA, Bianca B. Z
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UNICEP
Resumo
A pesquisa justifica-se em extrair, quantificar e genotipar o DNA das amostras coletadas de progênies F1 de cruzamentos intra e interespecíficos com marcadores moleculares, a fim de confirmar sua condição híbrida ou não. O projeto foi executado na Embrapa Pecuária Sudeste, onde usando P. regnellii e híbridos de P. regnellii como genitores femininos, e as seguintes espécies foram usadas como genitores masculinos: (P. plicatulum x P. guenoarum); P. atratum; P. malacophyllum; P. regnellii; P. lenticulare; P. plicatulum; e P. guenoarum. Destes cruzamentos, 159 progênies F1 foram pré-selecionadas visualmente pelo melhorista e foram analisadas neste trabalho. O DNA foi extraído de acordo com o protocolo CTAB, a quantificação dos DNAs extraídos foi realizada em espectrofotômetro e sua qualidade foi verificada em gel de agarose 1,5% corado com brometo de etídeo (10%). Com base em estudos anteriores foram selecionados doze marcadores moleculares para a realização da genotipagem dos possíveis híbridos. A partir daí realizou-se a PCR e os produtos da amplificação foram separados por eletroforese em gel de poliacrilamida a 6% e gel de Agarose a 2%. A presença de alelos exclusivos do genitor masculino na progênie foi utilizada como critério de ocorrência de hibridação.
Descrição
The research is justified in extracting, quantifying and genotyping the DNA from samples collected from F1 progeny of intra- and interspecific crossings with molecular markers in order to confirm their hybrid or non hybrid condition. The project was carried out in Embrapa Southeastern Cattle Raising, where P. regnellii and P. regnellii hybrids were used as female genitors, and the following species were used as male genitors: (P. plicatulum x P. guenoarum); P. atratum; P. malacophyllum; P. regnellii; P. lenticulare; P. plicatulum; and P. guenoarum. Of these crossings, 159 F1 progeny were visually pre-selected by the bestist and were analyzed in this work. The DNA was extracted according to the CTAB protocol, the quantification of the extracted DNAs was performed in a spectrophotometer and its quality was verified in agarose gel 1.5% stained with ethidium bromide (10%). Based on previous studies twelve molecular markers were selected for the genotyping of possible hybrids. From that point on, PCR was performed and the amplification products were separated by electrophoresis in 6% polyacrylamide gel and 2% Agaro se gel. The presen
Palavras-chave
Citação
identificação; hibridação; marcador microssatélite, marcador intermicrossatélite.